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關(guān)于熒光定量PCR的應用,您都知道多少呢

更新時(shí)間:2020-12-07瀏覽:1375次

   關(guān)于熒光定量PCR的應用,您都知道多少呢

  熒光定量PCR是在PCR擴增反應體系中加入熒光基團,通過(guò)實(shí)時(shí)檢測擴增反應中每個(gè)周期產(chǎn)物的熒光信號,然后通過(guò)標準曲線(xiàn)定量分析未知模板的方法。以探針?lè )晒舛繛槔涸赑CR擴增中,加入一對引物,并加入一個(gè)特異的熒光探針。探針兩端分別標記有報告熒光基團和猝滅熒光基團。
  熒光探針組的熒光信號在擴增開(kāi)始時(shí)被任何一組熒光探針所阻斷,熒光信號被熒光探針*阻斷,從而使熒光監測系統能夠接收到熒光信號,即每個(gè)擴增出的DNA鏈中,都有一個(gè)熒光分子形成,使熒光信號的積累與PCR產(chǎn)物的形成*同步。

熒光定量PCR

  關(guān)于熒光定量PCR的應用分析:
  1、核酸定量分析:對傳染性疾病進(jìn)行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的檢測,轉基因動(dòng)植物基因拷貝數的檢測,RNAi基因失活率的檢測等。
  2、基因表達差異分析:比較經(jīng)過(guò)不同處理樣本之間特定基因的表達差異(如藥物處理、物理處理、化學(xué)處理等),特定基因在不同時(shí)相的表達差異以及CDNA芯片或差顯結果的確證
  3、SNP檢測:檢測單核苷酸多態(tài)性(SNP)對于研究個(gè)體對不同疾病的易感性或對特定藥物的不同反應具有重要意義。由于SNP的結構簡(jiǎn)單,一旦知道SNP的結構和信息量,采用這種技術(shù)進(jìn)行高通量的SNP檢測將會(huì )變得簡(jiǎn)單而準確。
  4、甲基化檢測:甲基化與許多人類(lèi)疾病有關(guān),尤其是癌癥。DNA在擴增前經(jīng)過(guò)處理,使未甲基化的胞嘧啶變成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶則不受影響。用特異性引物和TaqMan探針區分甲基化和非甲基化DNA,不僅簡(jiǎn)便而且靈敏。
  5、產(chǎn)前診斷:人們不能治療由遺傳物質(zhì)變化引起的遺傳病。到目前為止,我們只能通過(guò)產(chǎn)前監測來(lái)減少病兒的出生,從而預防各種遺傳病的發(fā)生,從母體外周血中分離胎兒DNA,用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測Y性別決定區基因是一種無(wú)創(chuàng )的方法。

 

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